消化在线: 曲美他嗪影响糖尿病大鼠心肌和脂肪组织
来源：
曲美他嗪影响糖尿病大鼠心肌和脂肪组织葡萄糖转运体4和线粒体能量代谢研究
立题依据
曲美他嗪改善缺血条件下心肌的能量供应主要是通过抑制心肌脂肪酸?氧化的某一环节，并促进葡萄糖氧化利用，从而在单位氧耗下产生更多ATP，大大改善了冠心病的心肌供能，所以，起效前提是葡萄糖氧化增加。但是，对于糖尿病患者，葡萄糖转运体（glucose transporter ，GLUT）异常导致葡萄糖进入细胞减少是一个重要和普遍的共性现象，是限制细胞内葡萄糖代谢的主要限速步骤，也是糖尿病发病的主要原因之一。所以，如果没有顺畅的葡萄糖入胞过程，曲美他嗪引起的这种代谢产能途径的改变将难以带来益处。因而，曲美他嗪是否确实可以给合并糖尿病的冠心病患者带来益处，并以何种机制进行是临床治疗中亟待解决的问题。而解决该问题的关键在于曲美他嗪能否改善糖尿病时葡萄糖转运体紊乱和线粒体能量代谢异常。
许多临床研究显示曲美他嗪有利于任何缺血状态下心肌的改善，包括心肌缺血发作的减少和心功能的改善， 由于冠心病患者超过60%合并糖代谢异常，所以研究人群中也不乏合并糖代谢紊乱者。甚至有研究提示曲美他嗪也有利于糖尿病合并缺血性心肌病患者的骨骼肌葡萄糖有氧氧化。曲美他嗪对于糖尿病心肌梗死模型心肌保护和对于冠心病患者胰岛素抵抗改善也有相关报道。
所以本研究者提出假说：曲美他嗪可以改善糖尿病时的GLUT4代谢紊乱，增加GLUT4的表达，从而改善糖尿病状态的糖代谢和能量代谢。
由于GLUT4主要存在于骨骼肌、心肌、脂肪细胞中，所以本研究分成三部分进行。1）证实曲美他嗪可以改善糖尿病时心肌GLUT4代谢紊乱；2）并在全身主要细胞同期表现，包括骨骼肌、心肌、脂肪细胞、胰岛细胞、上皮细胞、血管平滑肌细胞、内皮细胞；3）改善线粒体葡萄糖和脂肪酸氧化比例，更多利用葡萄糖氧化供能。
拟解决关键问题：
GLUT4代谢紊乱同期表达在全身多种主要细胞并同期改善；
主要参考文献：
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三、研究目标与研究内容
研究目标：
1）证实曲美他嗪可以改善糖尿病时GLUT4代谢紊乱；
2）并在全身主要细胞同期表现。
研究内容：
1）观察曲美他嗪对2型糖尿病大鼠心肌GLUT4蛋白表达和血糖及胰岛素的影响；
在全身主要细胞包括骨骼肌、心肌、脂肪细胞、胰岛细胞、上皮细胞、血管平滑肌细胞、内皮细胞中观察同时段GLUT4蛋白表达表现；
四、研究方案（包括研究对象、研究方法、技术路线、统计方法等）
研究对象：2型糖尿病SD大鼠
研究方法：
1）建立模型：将雄性SD大鼠采用Reed法，即高脂、高果糖饲料(40%脂肪、42%碳水化合物和18%蛋白质)喂养4-6周及小剂量链脲佐菌素(35mg/kg)一次性腹腔注射建立2型糖尿病大鼠模型。
2）分组干预：建模后随机分为曲美他嗪治疗组、空白对照组、模型对照组。每组25-30只。造模后治疗组采用曲美他嗪20mg/(kg?d)灌胃给药2-4周。
3）指标检测：取空腹血样；随即处死大鼠取附睾周围白色脂肪组织、心脏、胰腺、骨骼肌、降主动脉、腹部皮肤,1）制作石蜡切片,免疫组织化学染色,光学显微镜观察脂肪组织、心肌、胰腺、骨骼肌、降主动脉、腹部皮肤GLUT4表达情况；2）心肌、骨骼肌、脂肪组织荧光定量RT—PCR技术测定GLUT4 mRNA，Western印迹测定GLUT4蛋白表达。3）放免法测定血清胰岛素水平的变化，并检测c肽、糖化血清蛋白、糖化血红蛋白，并计算胰岛素抵抗指数RI。4）各组大鼠，每组12只，进行30min等容离体心脏Langendorff灌注，和脂肪组织育养，测定样本葡萄糖含量及3H2O计数，评估心肌及脂肪组织葡萄糖和脂肪酸氧化率；Western印迹法检测心肌细胞膜和脂肪细胞膜GLUT4蛋白表达水平。
任艺虹